العلوم الحياتيةالعلوم العامةتجارب تقنيات نباتية وحيوانية

دراسة ملحقات البشرة في النبات ( الشعيرات والثغور ) Study extensions skin in the plant (filaments and

تحتوي البشرة الخارجية للنبات على بعض التراكيب المميزة لكل نوع من أنواع النبات والتي يمكن دراستها واعتبارها كأحد الأسس المميزة للنباتات , كما أن لهذه التراكيب أهمية كبيرة في حياة النبات.

ملحقات البشرة في النبات وأنواعها

ومن هذه التراكيب الثغور stomata والزوائد الشعرية trichomes على سطح أوراق النباتات , فالثغور تختلف باختلاف نوع النبات إن كان أحادي الفلقة أو ثنائي الفلقة ومنها الغدية والصولجانية والغائرة , أما الشعيرات فمنها البسيطة ومنها المركبة ومنها المتفرع ومنها ما هو وحيد الخلية ومنها ما هو عديد الخلايا كما يمكن باتباع هذه الطريقة دراسة خلايا البشرة والأدمة cuticle.ولكل تركيب من هذه التراكيب أجزاء تتكون منها ووظائف مهمة في حياة النبات لايتسع المجال لذكرها ونقتصر هنا على دراستها من ناحية عملية .

شكل الشعيرات على ورقة النبات

الشعيرات والثغور في النبات

المواد والأدوات اللازمة لدراسة ملحقات البشرة

أوراق نباتية مختلفة ( الخبيزة , النعناع , الزيتون , تباع الشمس , المنثور – قمح – ذرة – شعير ) – شفرات حادة – شرائح وأغطية زجاجية – صبغة اليود أو أزرق الميثيلين – ملقط -مجهر ضوئي .خطوات العمل :
تجهز العينات التي يراد دراستها بغسلها بالماء المقطر لإزالة الأتربة والأوساخ عنها , وإذا كانت هذه النباتات مأخوذة من نباتات مجففة فتنقع في ماء مقطر لمدة 24 ساعة لتصبح لينة ثم نبدأ بالخطوات التالية :1- باستخدام الملقط اعمل سلخة في ورقة أو ساق إحدى النباتات المتوفرة لديك وضعها على الشريحة مع التأكد من فردها جيداً على الشريحة .
2- ضع قطرة أو قطرتين على السلخة من صبغة اليود أو أزرق الميثيلين أو أي صبغة مناسبة حسب الدراسة ثم غط الشريحة بغطاء نظيف .
3- افحص الشريحة تحت المجهر باستخدام العدسة الصغرى ثم الكبرى لملاحظة شكل الثغور وكذلك نوع الشعيرات الموجودة .
4- يمكن حفظ النباتات مؤقتاً أو بصورة مستديمة حسب الرغبة باتباع الطرق التي تم شرحها مسبقاً .
5- كرر الخطوات السابقة باستخدام أوراق نباتية مختلفة ( ذات فلقة وذات فلقتين .
ملاحظة : لدراسة الثغور من حيث العدد أو لقياس فتحة الثغور باستخدام الشريحة الميكرومترية يمكن استخدام الطرق التالية :

 

طرق دراسة ثغور النبات عملياً

1- طريقة البصمة ( القوالب ) replica

يمكن تثبيت فتحة الثغر بواسطة عمل البصمة لسطح الورقة باستخدام السيليكون المطاطي بحيث ينتشر على طبقة البشرة مكونةً عشاءً رقيقاً متماسكاً مطبوع عليه مكونات البشرة .
وتتلخص هذه الطريقة بالخطوات التالية :
أ‌- يوضع 0.5 مل من السيليكون المطاطي ويحرك جيداً في وعاء بلاستيكي صغير .
ب‌- باستخدام قطارة تضاف مادة نيوكور 28 نودكس Nu-cure 28,Nuodex أو ما يعرف بالجيرانيوم إلى السيليكون وهو كمادة محفزة لانتشار السيليكون على سطح الورقة ويفضل استخدامه حديثاً لتغير خصائصه بطول الوقت .
ج-تخلط هذه المحتويات بسرعة بشكل جيد بملعقة معدنية .
د- يضغط هذا المحلول بصورة جيدة على سطح الورقة بحيث تكون ممسوكة باليد الأخرى .
هـ-يضاف المزيد من المادة المحفزة على سطح الورقة للتأكدمن تشرب السطح بها وذلك لمدة دقيقتين .
و-بفعل الطبقة المطاطية تتكون طبعة سالبة لسطح الورقة تقشر هذه الطبقة وتنزع برفق ثم تجفف لعدة ساعات ( يمكن استخدام فرن تجفيف عند 40 ْم ) .
ز-تكرر هذه التحضيرات لضمان الحصول على تحضيرات جيدة .

 

2- بصمة طلاء الأظافر 

يمكن استخدام طلاء الأظافر الشفاف ( خلات السيليلوز ) بوضعه مباشرة على سطح ورقة النبات ثم نزعه بعد التجفيف ووضعه على شريحة زجاجية وفحصه تحت المجهر لعد الثغور وقياس أبعادها ( لا يفضل استخدام هذه الطريقة لتثبيت الفتحة الثغرية ) .
3-بصمة الشريط اللاصق :
يمكن استخدام الشريط اللاصق لعد الثغور فقط بلصقه مباشرة على سطح الورقة النباتية ثم نزعه وتحميله على شريحة ثم فحصه تحت المجهر لعد الثغور وقياسها .

 

3- طريقة التفكيك 

تستعمل هذه الطريقة لتفكيك بعض الأنسجة لدراسة الخلايا المفردة لأن القطاعات العرضية أو الطويلة لا تكفي لتوضيح تلك الخلايا لذلك يمكن اللجوء إلى تفكيك الخلايا لتكون معزولة عن بعضها البعض وذلك من خلال إذابة مادة الصفيحة الوسطى التي تربط الجدر الخلوية ببعضها , وهناك عدة طرق مستخدمة في طريقة التفكيك .

أ-الماء المغلي :
تستعمل هذه الطريقة لتفكيك العينات النباتية الطرية قليلة الأنسجة الخشبية والتي تتكون جدرها من مواد سليلوزية .
طريقة العمل :
1-تقطع العينة النباتية إلى أجزاء صغيرة وتوضع في كأس به ماء .
2-تغلى العينة على اللهب لمدة ساعتين أو أكثر حتى يتم تفكيكها بإبرة التشريح .
3-تؤخذ كمية قليلة من العينة المغلية وتوضع على شريحة وتفكك الأنسجة .
4-تزال جميع الأنسجة المرئية الكبيرة .
5-يضاف لها كمية من محلول الجليسرين المخفف بالماء ثم تغطى بغطاء الشريحة ثم تفحص بالمجهر .

ب-محلول 5% هيدروكسيد الصوديوم أو البوتاسيوم :
تستخدم هذه الطريقة لفصل خلايا الأنسجة البرانشيمية أو العناصر الملجننة .
طريقة العمل :
1-تؤخذ أجزاء صغيرة من العينة المراد تفكيكها وتوضع في أنبوبة اختبار ويضاف لها كمية مناسبة من محلول هيدروكسيد الصوديوم أو البوتاسيوم بتركيز 5% .
2-توضع أنبوبة الإختبار في حمام مائي وتغلى لمدة 20-30 دقيقة .
3-توضع العينة على شريحة وتفكك كما سبق ويضاف لها قليلاً من الجليسرين وتغطى العينة بغطاء شريحة ثم تفحص .

ج-محلول 10% حمض الكروميك و 10% حمض النيتريك :
تستخدم هذه الطريقة لتفكيك العينات التي تحتوي على طبقة واحدة من الخلايا الملجننة أو من عدة طبقات ملجننة مغمورة في النسيج البرنشيمي .
طريقة العمل :
1-تؤخذ كمية قليلة من العينة وتوضع في أنبوبة اختبار يوضع بها محلول مكون من حجمين متساويين من 10% محلول حمض الكروميك و 10% حمض النيتريك .
2-تترك العينة في المحلول لمدة ساعتين أو أكثر .
3-توضع العينة على شريحة وتفكك كما سبق ويضاف لها قليلاً من الجليسرين وتغطى العينة بغطاء شريحة ثم تفحص .

 

4- طريقة سكالتز للتفكيك schultz`s maceration process

تستعمل هذه الطريقة لتفكيك الخلايا الملجننة بنسبة عالية :
طريقة العمل :
1-تؤخذ كمية قليلة من العينة وتوضع في أنبوبة اختبار ويضاف لها كمية كافية من 50% من محلول حمض النيتريك وقليل من بلورات كلورات البوتاسيوم .
2-توضع الأنبوبة في حمام مائي وتغلى لمدة 20-30 دقيقة . مع ضرورة وضعها في خزانة الأبخرة لخروج غازات من المواد ذات التأثير الضار .
3-إذا توقف تصاعد الغازات يضاف بلورات يضاف القليل من كلورات البوتاسيوم .
4-توضع العينة على شريحة وتفكك كما سبق ويضاف لها قليلاً من الجليسرين وتغطى العينة بغطاء شريحة ثم تفحص .

 

ملاحظة هامة :

نظراً لأهمية الحصول على نتائج ممتازة لفحص العديد من العينات النباتية بمختلف أنواعها وأحجامها ومصادرها يلزم اتباع طرق دقيقة ومنظمة والقيام بهذه الطرق بكل دقة وتأني واستعمال الأساليب الفنية اللازمة ولابد من اكتساب الخبرة الكافية في هذا العمل لأهمية ذلك في الحصول على أفضل النتائج .
وأهم هذه الطرق : الطرق والتثبيت ونزع الماء والترويق والتشريب ثم الطمر وتحميل العينة على جهاز التقطيع ثم التقطيع وإزالة مادة الطمر ثم الصبغ والتحميل على الشرائح الزجاجية .

الوسوم

مقالات ذات صلة

اترك تعليقاً

لن يتم نشر عنوان بريدك الإلكتروني. الحقول الإلزامية مشار إليها بـ *

Flag Counter
إغلاق