الأحياء الدقيقةالعلوم الحياتيةالعلوم العامةتجارب علميةتجارب في علم الأحياء الدقيقة

صبـغ الأسـواط في البكتيريا Flagella staining

طريقة صبـغ أسـواط البكتيريا Flagella staining

تمهيـد عن صبغ الأسواط البكتيرية


ترجع الحركة في معظم أنواع البكتيريا المتحركة إلى امتلاك خلاياها أسواطاً في أحد أطرافها أو كليهما أو موزعة على جانبيها . وحركة البكتيريا و عدد وتوزيع الأسواط على خلاياها تعتبر من الصفات الهامة المميزة للأنواع البكتيرية تستغل في أغراض التصنيف .
والمشكلة الحقيقية في صبغ الأسواط هو ضآلة سمكها الذي لا يقع ضمن القوة التمييزية للميكروسكوبات , وعلى ذلك فإن من أهم الخطوات التي تسبق عملية الصبغ إضافة بعض المواد التي تترسب على السوط لتزيد من سمكه ليسهل مشاهدته بالميكروسكوب الضوئي العادي . ويعد حمض التانيك Tanic acid من أهم المواد المستعملة لذلك بالإضافة إلى أنه يعطي قابلية أفضل للخلايا لتقبل الأصباغ المستعملة .
وهناك عدة طرق مستخدمة لصبغ الأسواط ولكن من المهم استعمال شرائح غاية في النظافة.


المواد والأدوات اللازمة لصبغ الأسواط في البكتيريا


مزرعة من بكتيريا Erwina carotovora وأخرى من Agrobacterium tumefaciens لايزيد عمر المزرعة عن ( 12-24) ساعة – ماء مقطر – صبغة الأسواط أ , ب – شرائح نظيفة .
خطوات العمل :
1- جهز مزرعة من بكتيريا Erwina carotovora وأخرى من Agrobacterium tumefaciens لايزيد عمر المزرعة عن 12-24 ساعة على آجار مائل .
2- اغمر سطح المزرعة بالماء المقطر مع التحريك الخفيف .
3- انقل معلق الخلايا الخفيف جداً والمتكون في الأنبوبة إلى أنبوبة نظيفة ثم اترك الأنبوبة حوالي ساعة , في خلال ذلك قم بتحضير الصبغتين أ , ب ( راجع الملحق ) .
4- انقل نقطة من معلق الخلايا إلى شريحة نظيفة مع ملاحظة أخذ النقطة من السطح حيث أن الخلايا المتحركة تكون بالقرب من السطح .
ضع الشريحة مائلة قليلاً لتنحدر نقطة معلق الخلايا على الشريحة مكونة غشاء ثم تترك الشريحة ليجف الغشاء في الهواء .
5- اغمر الشريحة بمحلول الصبغة ( أ ) لمدة 6 – 8 دقائق .
6- تخلص من الصبغة بصبها في الحوض المعد لذلك ثم اغسل الشريحة بالماء المقطر جيداً لمنع تكون ترسبات تعيق الرؤية .
7- اغمر الشريحة بمحلول ( ب ) لمدة 30 ثانية ثم اغسل بالماء المقطر .
8- اترك الشرائح لكي تجف .
9- افحص الشرائح بالعدسة الزيتية مع وصف شكل الخلايا وارسمها موضحاً عدد الأسواط ومواضعها بالنسبة للخلية البكتيرية .

صبـغ الأسـواط البكتيريا Flagella staining

الأسواط البكتيرية

الوسوم

مقالات ذات صلة

Flag Counter
إغلاق