منتديات التفوق  

العودة   منتديات التفوق > منتدى العلوم > العلوم الحياتية > تجارب فسيولوجيا النبات

تجارب فسيولوجيا النبات تجارب علمية في علم وظائف أعضاء النبات ( فسيولوجي )

الإهداءات

إضافة رد
 
أدوات الموضوع انواع عرض الموضوع
قديم 08-26-2012, 11:17 PM   #1
مدير عام


الصورة الرمزية admin
admin غير متواجد حالياً

بيانات اضافيه [ + ]
 رقم العضوية : 1
 تاريخ التسجيل :  Oct 2011
 أخر زيارة : يوم أمس (07:56 PM)
 المشاركات : 8,107 [ + ]
 التقييم :  10
افتراضي فصل بعض المركبات النباتية بالفصل الكروماتوجرافي Separation of some compounds by chromatography



المركبات, النباتية, الكروماتوجرافي, chromatography, compounds, بالفصل, separation, some

فصل بعض المركبات النباتية باستخدام الفصل اللوني الكروماتوجرافي
Separation of some compounds by chromatography

تستخدم هذه الطريقة لفصل المركبات المختلفة الموجودة في النبات مثل الأحماض العضوية والأحماض الأمينية والسكريات والدهون والبروتينات والأصباغ النباتية الموجودة في النباتات لغرض الدراسات الفسيولوجية والكيميائية الحيوية .
ومن هذه الطرق اللونية الشائعة الفصل اللوني الورقي والفصل العمودي والغازي وغيرها . وتستخدم طريقة أو أكثر بغرض التقدير النوعي للمركبات أو فصل كل مركب عن الآخر بغرض التقدير الكمي لكل نوع من هذه المركبات .
وسنقوم هنا بأخذ مثال على كل طريقة من طرق الفصل الكروماتوجرافي الأكثر شيوعاً واستخداماً في المختبرات .

أولاً : فصل السكريات بطريقة الفصل اللوني الورقي :
وتتم هذه الطريقة بوجود مادة مذيبة على ورق خاص للفصل مثل أوراق الترشيح والتي تعتمد بدورها على وجود قوتين هما القوة الجاذبة الناتجة عن حركة المادة المذيبة خلال ورقة الفصل والقوة المعوقة الموجودة على ورقة الفصل .

المركبات النباتية بالفصل الكروماتوجرافي Separation some compounds chromatography المركبات النباتية بالفصل الكروماتوجرافي Separation some compounds chromatography

المواد والأدوات اللازمة :
أوراق الفصل الكروماتوجرافي ( ورق ترشيح واتمان رقم 1 ) – محاليل سكرية 1% مثل الجلوكوز والسكروز والأرابينوز والفركتوز والجلاكتوز والرايبوز – محاليل مجهولة مثل رحيق الأزهار أو مستخلص نباتي أو عصير نباتي – المذيب مثل T-butanol : glacial acetic acid : water 3:1:1 أو فينول : ماء بنسبة 1:4 – محلول الإظهار P-anisidine spray reagent ( يحضر وقت التجربة من 2 مل من حمض الفوسفوريك مع 50 مل من 95 % إيثانول ثم يضاف 0.5 جم من P-anisidine ثم يضاف حمض الهيدروكلوريك المركز ببطء حتى يصبح اللون أرجواني ) – أواني خاصة بالفصل – قلم ومسطرة .

خطوات العمل :
1- يتم عمل خط بقلم الرصاص علة ورق الترشيح على بعد 5 سم من حافة الورقة ثم ضع إشارات × على مسافات متساوية بعدد المحاليل المجهولة والتي يراد فصل مكوناتها مع كتابة اسم كل محلول أسفل هذه الإشارة .
2- ارفع طرف الورقة من جهة الخط باستخدام ساق زجاجية مثلاً بحيث لا تلامس أي سطح أثناء وضع العينات عليها .
3- باستخدام ماصة ( ميكروبيبيت ) خذ 3 ميكروليتر من المحلول المجهول وضعه عند العلامة الخاصة به واتركها حتى تجف تماماً . كرر العملية عدة مرات لنفس المحلول مع وضع القطرات على نفس المكان .
4- كرر الخطوة الثالثة لبقية المحاليل الموجودة لديك مع التأكد من وضع كل محلول على العلامة الخاصة به .
يمكن ثني الورقة على شكل اسطوانة ثم تدبيس أطرافها . بحيث يكون الخط المرسوم باتجاه الفتحة السفلى للأسطوانة .
5- ضع المذيب في الوعاء الزجاجي على ارتفاع 3 سم من قاع الوعاء ثم ضع ورقة الفصل بحيث تكون الجهة المرسوم عندها الخط مغموسة في السائل المذيب .
6- أغلق الوعاء واتركه لمدة 12 - 14 ساعة ثم أخرج الورقة وانزع الدبابيس عنها وعلم على المنطقة التي وصل إليها السائل .
7- اترك الورقة حتى تجف تماماً ثم رش الورقة بالمحلول المظهر بواسطة مرش ثم ضع الورقة في فرن تجفيف عند 80 ْم لمدة 3 دقائق . ستظهر بقع ملونة دائرية الشكل تقريباً وبألوان مختلفة .
8- يمكن حساب Rf و Rrh للمركب كما يلي :
Rf = بعد مركز البقعة عن نقطة الأصل / بعد المذيب عن نقطة الأصل
Rrh = بعد مركز البقعة عن نقطة الأصل / بعد بقعة الرامينوزعن نقطة الأصل
ثانياً : فصل الأحماض الأمينية :
تعد الأحماض الأمينية وحدة البناء للبروتينات البنائية والوظيفية للنبات أو قد تدخل في تكوين بعض المركبات في النبات .
يمكن استخدام نفس الطريقة السابقة إلا أنه نظراً لإمكانية تداخل الأحماض الأمينية واحتمالية وجود عدد كبير منها سنتبع طريقة أخرى لهذه العملية وهي :

فصل الأحماض الأمينية بواسطة الفصل اللوني الورقي ثنائي الأبعاد
Separation of amino acids by tow dimentional paper chromatography

المركبات النباتية بالفصل الكروماتوجرافي Separation some compounds chromatography المركبات النباتية بالفصل الكروماتوجرافي Separation some compounds chromatography

المواد والأدوات اللازمة :
20 جم بطاطس مقشر – مخلوط من الأحماض الأمينية ( ألانين , سيرسن , تيروسين ) بتركيز 1ملجرام مذاب في 0.5 عياري حمض الخل – 1 لتر من الإيثانول 80 % - 350 مل من المذيبين ( محلول الفينول المائي المشبع و n-Butanol : glacial acetic acid : water بنسبة ( 1 : 1 : 3 ) – محلول الإظهار ويحضر أثناء الدرس العملي لعدم ثباته ( 0.1 جم ننهيدرين Ninhydrin في 100 مل من محلول n-Butanol المائي المشبع – أوراق فصل لوني – قمع بخنر – ماصات زجاجة رش – فرن تجفيف .

خطوات العمل :
1- يحضر مستخلص الأحماض الأمينية بإضافة 100 مل من الإيثانول 80 % إلى 30 جم من البطاطس المقشرة ثم تهرس في هاون خزفي ثم ترشح بقمع بخنر بالتفريغ .
2- انقل الراشح إلى طبق زجاجي وبخره عند درجة حرارة الغرفة وبالتفريغ إن أمكن أو في فرن التجفيف عند 45 ْم .
3- خذ العينة الناتجة بعد التبخير وحضر منها محلول مائي بتركيز 30 ملجرام / مل ماء.
4- ضع المذيب الأول في وعائين زجاجيين خاصين بالفصل والمذيب الثاني في وعائين آخرين ( إثنين لخليط الأحماض الأمينية وإثنين للمستخلص ) بحيث يكون ارتفاع المذيب 3 سم من قاع أواني الفصل .
5- ضع خط على بعد 5 سم من الحافة السفلى لورقة الفصل وعلم نقطة × ثم ضع قضيب زجاجي لرفع الورقة عن سطح الطاولة التي تعمل عليها وباستعمال ماصة دقيقة ضع نقطة من خليط الأحماض الأمينية وكرر هذه العملية عدة مرات على نفس النقطة ( حوالي 3 ميكروليتر ولاتزيد بقعة انتشار النقطة عن 1سم2 ) .
6- كرر العملية السابقة على ورقة فصل أخرى مستعملاً هذه المرة المستخلص النباتي .
7- ضع الورقتين في الوعائين المحتويين على المذيب الأول ( كل ورقة في وعاء منفصل ويمكن تشكيل ورقة الفصل على شكل اسطوانة إذا صعب تثبيتها على هيأتها) لمدة 12 ساعة تقريباً ثم علم المستوى الذي وصل إليه المذيب على ورقة الفصل بقلم رصاص .
8- اترك الورقتين تجف تماماً . ستجد أن الأحماض الأمينية قد تراصت على هيئة صف على امتداد النقطة التي وضعتها .
9- أدر الورقتين بحيث يكون صف الأحماض الأمينية للأسفل ثم ضعها في الوعائين المحتويين على المذيب الثاني ( كل ورقة في وعاء منفصل ) .
10- اترك الورقتين لمدة 12 ساعة تقريباً وبعد ذلك علم المستوى الذي وصل إليه المذيب بعد انتهاء الوقت .
11- اترك الورقتين تجفان تماماً ثم قم برشها بالمحلول المظهر الننهيدرين رشاً خفيفاً شاملاً الورقة كاملة . ثم ضع الورقتين في فرن التجفيف لمدة 5 دقائق عند 90 ْم ثم علم البقع الناتجة بقلم الرصاص .
12- نلاحظ أن الأحماض الأمينية تعطي ألواناً مختلفة بحسب نوعها , فاللون الأزرق دلالة على وجود phenylalanine , tyrosine , aspartic acid واللون البني الزيتوني دلالة على الحمض الأميني tryptophan واللون البني للأحماض aspargine , cystine واللون الأصفر proline .
13- وبحساب Rf لكل بقعة وبدلالة الألوان التي نحصل عليها يمكن معرفة نوعية الأحماض الأمينية الموجودة في أي مستخلص نباتي .

ثالثاً : فصل الصبغات النباتية بطريقةالفصل اللوني العمودي
Separation of plant pigments by column chromatography
يحتوي النبات على عدة أنواع من الصبغات مثل الكلوروفيل أ و ب والزانثوفيل والكاروتين وقد تمكن العلماء من فصل الصبغات النباتية المختلفة باستخدام طرق الفصل الكروماتوجرافي ومن أفضل هذه الطرق الفصل اللوني العمودي .
وسنقوم هنا بفصل الصبغات النباتية بهذه الطريقة والتعرف عليها كيفياً من خلال اللون الناتج.

المركبات النباتية بالفصل الكروماتوجرافي Separation some compounds chromatography

المواد والأدوات اللازمة :
10 جم من أوراق نباتية خضراء – كربونات الالسيوم – هاون – أسيتون 85 % - قمع فصل – إيثر إيثيلي – ماء مقطر – كبريتات الصوديوم اللامائية Anhydrous Na2SO4 .

خطوات العمل :
1- 10 جم من أوراق نباتية خضرء مع كمية قليلة من بلورات كربونات الكالسيوم ثم اهرسها في هاون لتكون عجينة ثم أضف 5 مل من أسيتون 85 % واستمر بالهرس .
2- انقل السائل المتكون إلى قمع فصل سعة 250 مل وبه 10 مل من الإيثر الإيثيلي , كرر العملية السابقة عدة مرات .
3- خذ الكمية التي حصلت عليها وضعها في هاون مرة أخرى وأضف كميات متساوية من الأسيتون المطلق والإيثر الإيثيلي ثم اهرسها جيداً .
4- انقل السائل المتكون إلى قمع فصل به 5 مل من الأسيتون و 5 مل من الإيثر الإيثيلي وأضف إليه 100 مل من الماء المقطر على جوانب القمع وببطء لكي لا يتكون مستحلب ثم أدر القمع يمنة ويسرى دون الرج حتى يتكون طبقتين .
5- تخلص من الطبقة السفلى بفتح صنبور قمع الفصل ( صورة القمع ) وكرر هذه العملية ثلاث مرات بترك السائل بضع دقائق للتتكون الطبقتين للتخلص من الأسيتون تماماً وللحفاظ على حجم الإيثر الإيثيلي ويمكن إضافة 5 – 10 مل من الإيثر الإيثيلي مع مراعاة أن يكون الحجم النهائي 15 مل .
6- ضع المحلول النهائي في زجاجة وأضف كمية من كبريتات الصوديوم اللامائية للتخلص من بقايا الماء وعند ذلك يكون المستخلص جاهزاً للفصل .
7- حضر أعمدة التحليل ( الفصل ) بسد الطرف الضيق بالقطن وضع كربونات الكالسيوم في العمود بطول 30 سم بحيث لا يكون بينها فراغات هوائية .ثم علق العمود على الحامل وأضف الإيثر الإيثيلي للعمود بالتدريج حتى يبتل العمود كلياً.
8- أضف مستخلص النبات ببطء 2- 3 مل لكل عمود على شكل قطرات , وعندما ينزل المستخلص عن مستوى الكربونات نقوم بإضافة الإيثر الإيثيلي .
9- تتبع فصل الصبغات والتي تتكون على شكل طبقات بحيث تكون السفلى ( التي لا تنزل مع المذيب ) تكون الكاروتينات ثم الزانثوفيل ثم كلوروفيل أ ثم كلوروفيل ب








 

رد مع اقتباس
قديم 08-08-2019, 02:52 PM   #2
عضو جديد


الصورة الرمزية carate
carate غير متواجد حالياً

بيانات اضافيه [ + ]
 رقم العضوية : 16341
 تاريخ التسجيل :  Aug 2019
 أخر زيارة : 08-08-2019 (03:29 PM)
 المشاركات : 2 [ + ]
 التقييم :  10
افتراضي



مشكورين (جدا )10 جدا جدا جدا جدا


 

رد مع اقتباس
إضافة رد

الكلمات الدليلية (Tags)
المركبات, النباتية, الكروماتوجرافي, chromatography, compounds, بالفصل, separation, some


الذين يشاهدون محتوى الموضوع الآن : 1 ( الأعضاء 0 والزوار 1)
 
أدوات الموضوع
انواع عرض الموضوع

تعليمات المشاركة
لا تستطيع إضافة مواضيع جديدة
لا تستطيع الرد على المواضيع
لا تستطيع إرفاق ملفات
لا تستطيع تعديل مشاركاتك

BB code is متاحة
كود [IMG] متاحة
كود HTML متاحة

الانتقال السريع

Bookmark and Share


الساعة الآن 05:32 AM

أقسام المنتدى

المنتدى الإسلامي Islamic Forum | علوم القران الكريم Quran sciences | تفسير القران الكريم | علوم الحديث | ثقافة اسلامية | منتدى اللغة العربية والآداب | الشعر | قصص أدبية | الحكم والأمثال | منتدى العلوم | العلوم الحياتية | الأحياء الدقيقة | العلوم الطبيعية | المنتدى العام | منتدى الثقافة العامة | المنتدى الصحي | الصحة العامة | الغذاء والصحة - الطب البديل - العلاج بالاعشاب والغذاء | صحة الطفل | منتدى المعلم | خطط وتحليل محتوى التربية الإسلامية | خطط و تحليل محتوى للمواد العلمية | منتدى الطلاب | منتدى امتحانات الطلاب | القسم الإداري والوظائف | قسم الأبحاث الطلابية | الثانوية العامة التوجيهي | اهتمامات المعلم | خطط وتحليل محتوى اللغة العربية | خواطر وحوارات أعضاء المنتديات | سؤال وجواب - سين - جيم Questions and Answers | منتدى التدريب و التطوير | أسئلة وأجوبة لمواد التوجيهي | خطط وتحليل محتوى اللغة الإنجليزية | خطط وتحليل محتوى لمادة الحاسوب | خطط وتحليل محتوى لمواد الإجتماعيات | خطط وتحليل محتوى التربية المهنية والفنية والرياضية والثقافة المالية | تجارب في علم الأحياء الدقيقة | منتدى الأمراض وعلاجها | منتديات البيت العربي | منتديات المرأة العربية | منتديات الرجل العربي | منتدى المطبخ العربي | مستلزمات البيت العربي | منتدى الأدعية والمأثورات | أسئلة واجوبة اجتماعيات | شخصيات وأعلام | السياحة والسفر | تجارب فسيولوجيا النبات | تجارب في فسيولوجيا الإنسان والحيوان | تقنيات نباتية وحيوانية | أسئلة وأجوبة رياضيات | اسئلة واجوبة فيزياء | اسئلة واجوبة كيمياء وعلوم أرض | أسئلة وأجوبة أحياء وثقافة عامة | أسئلة وأجوبة عربي - لغة عربية | أسئلة وأجوبة دين وعلوم اسلامية | اسئلة واجوبة حاسوب | الخدمات العامة | أسئلة واجوبة انجليزي | أسئلة امتحانات عربي للمراحل الأساسية | أسئلة امتحانات مواد علمية للمراحل الأساسية | أسئلة امتحانات حاسوب للمراحل الأساسية | أسئلة امتحانات انجليزي للمراحل الأساسية | أسئلة امتحانات اجتماعيات ومهني للمراحل الأساسية | أبحاث جامعية | أبحاث لطلاب المدارس في التخصصات العلمية | أبحاث لطلاب المدارس في التخصصات الأدبية | الأدوية والمستحضرات الصيدلانية | المضادات الحيوية | المسكنات ومضادات الألم ومخفضات الحرارة | أدوية الدم والقلب والأوعية الدموية | أدوية الأنف والأذن والحنجرة وأدوية الجهاز التنفسي | خطط منوعة - تخصصات مختلفة | قسم رياض الأطفال | قصص شعبية | قصص خيالية | قصص واقعية | قصص اسلامية | أسئلة وأجوبة في العلوم والرياضيات Questions and Answers in science and math | أسئلة وأجوبة في التاريخ والجغرافيا Questions and Answers in geography and history | أسئلة وأجوبة دينية Questions and Answers in relision | أسئلة وأجوبة في اللغة العربية واللغات الأخرى Questions and Answers in languages | أسئلة وأجوبة في الرياضة Questions and Answers in sports | تحضير دروس يومي لجميع المواد | قسم أوراق العمل لجميع المواد | قسم نتائج التوجيهي - نتائج الثانوية العامة | طلاب الشامل - أخبار ونماذج من أسئلة السنوات السابقة لامتحان الشهادة الجامعية المتوسطة | منتدى اللغة العربية العام | قسم امتحانات تيميس وبيسا timss and PISA | أسئلة وأجوبة عامة | أسئلة وأجوبة أحداث وتواريخ | قسم التربية الخاصة وعلم النفس | خطط وتحليل محتوى الرياضيات - الفصل الأول والثاني | خطط وتحليل محتوى فيزياء - الفصل الأول والثاني | خطط وتحليل محتوى الكيمياء- الفصل الأول والثاني | خطط وتحليل محتوى العلوم الحياتية - الفصل الأول والثاني | خطط وتحليل محتوى علوم الأرض- الفصل الأول والثاني | أسئلة امتحانات التربية الاسلامية للصفوف الأساسية | منتدى التوظيف والوظائف | وظائف تعليم وتدريس | وظائف هندسية | وظائف ادارة ومحاسبة | وظائف كمبيوتر وبرمجة | وظائف منوعة | وظائف طبية |



Powered by vBulletin™ Version 3.8.7
Copyright © 2019 vBulletin Solutions, Inc. All rights reserved.
.:: تركيب وتطوير مؤسسة نظام العرب ::.
خاص بمنتديات التفوق - يرجى ذكر المصدر عند الإقتباس
This Forum used Arshfny Mod by islam servant